由中國認證認可協(xié)會(huì )檢測分會(huì )、天津分析測試協(xié)會(huì )標準物質(zhì)與檢測技術(shù)分會(huì )、天津阿爾塔科技有限公司與我要測網(wǎng)聯(lián)合主辦的“阿爾塔有約-精彩演繹 實(shí)力綻放”食品安全在線(xiàn)系列研討會(huì )，于6月21日圓滿(mǎn)舉辦第二期。會(huì )后，參與網(wǎng)友提出若干問(wèn)題。阿爾塔科技將網(wǎng)友問(wèn)題進(jìn)行了篩選和整合，并與專(zhuān)家及時(shí)溝通。

現將問(wèn)答內容集中呈現。

一、中國工程院院士，中國農業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫學(xué)院院長(cháng)沈建忠問(wèn)題答疑

1、硝基呋喃類(lèi)和瘦肉精類(lèi)現在有QUECHERS法嗎？

回答：硝基呋喃類(lèi)代謝物和β-受體激動(dòng)劑類(lèi)藥物的樣品前處理方法要求比較高，現在方法已經(jīng)很成熟，在標準方法中都是應用經(jīng)典方法，在文獻報道中有QuEChERS的方法。

2、目前在獸藥檢測技術(shù)上還有那些要改進(jìn)的地方？

回答：主要還是樣品前處理方法需要突破，實(shí)現多類(lèi)獸藥的高通量測定。

3、標準中對同一種獸藥經(jīng)常使用不同標記的內標，是什么原因？

回答：只要是穩定同位素標記的內標，效果是一樣的，可能的原因是價(jià)格和來(lái)源。

4、獸殘測定質(zhì)控樣品制備的關(guān)鍵點(diǎn)和難點(diǎn)是什么？

回答：質(zhì)控樣品制備首先要獲得空白樣品，然后設計好陽(yáng)性添加樣品的濃度，最好能夠同時(shí)包括試劑空白樣品。

5、獸殘多殘留測定國標方法預計什么時(shí)候出來(lái)？

回答：2021年頒布的36項獸藥殘留國標中有四環(huán)素類(lèi)、磺胺類(lèi)和喹諾酮類(lèi)的多殘留方法，多類(lèi)藥物的篩選方法正在制定，估計近幾年會(huì )有結果。

6、哪些場(chǎng)景下用小型質(zhì)譜儀比較合適？

回答：現場(chǎng)檢測需要用到小型質(zhì)譜儀，但是目前還沒(méi)有已經(jīng)市場(chǎng)化同時(shí)性能指標優(yōu)秀的小型質(zhì)譜儀。

7、為什么一定用乙腈提??？可以用甲醇，乙醇等低毒性溶劑提取獸藥分子嗎？

回答：獸藥的提取溶劑選擇多樣，可以用有機溶劑（甲醇、乙腈等），也可以用緩沖液等極性溶劑。

8、德國一個(gè)實(shí)驗室使用SCIEX液質(zhì)（低分辨質(zhì)譜）做出來(lái)了五百多種生物毒素同時(shí)測定，有相關(guān)配套標準立項嗎？

回答：多類(lèi)獸藥檢測的篩選方法已有標準立項。

9、高分辨質(zhì)譜x500r跟普通三重四級桿有哪些優(yōu)勢？

回答：高分辨TOF與三重四極桿是兩種類(lèi)型的儀器，分別側重于精確質(zhì)量的全掃描篩查和準確定量的靶向檢測。

10、獸藥殘留檢測樣本前處理的難點(diǎn)在哪里？

回答：現階段多類(lèi)獸藥殘留檢測的難點(diǎn)在于不同類(lèi)獸藥的理化性質(zhì)差異較大，在提取和凈化步驟中難以兼顧；另外有些種類(lèi)的獸藥需要檢測蛋白結合狀態(tài)的藥物或代謝物，也會(huì )增加多類(lèi)獸藥同時(shí)檢測的難度。

二、天津阿爾塔科技公司創(chuàng )始人、董事長(cháng)、首席科學(xué)家 張磊博士問(wèn)題答疑

1、溶解性質(zhì)不同的獸殘在配制標液的過(guò)程中的注意事項。

回答：溶解性是配制標液時(shí)要考慮的問(wèn)題之一，其次還要保證組分的穩定性、檢測方法等眾多因素。將不同的組分配制成混標時(shí)還要考慮這些組分是否能溶解到同一種溶劑中等因素。

2、穩定同位素標準品是否可以定制？

回答：可以。阿爾塔目前可提供的農藥、獸藥、醫藥、食品、環(huán)境、臨床等穩定同位素標記內標物1700余種，常用的農獸藥內標物都實(shí)現了國產(chǎn)化或在研發(fā)計劃中，您可以先咨詢(xún)我們的銷(xiāo)售人員您需要的產(chǎn)品是否已經(jīng)在庫存目錄中，如果沒(méi)有的話(huà)原則上可以定制。

3、未來(lái)獸殘檢測領(lǐng)域，穩定同位素標記產(chǎn)品所占比重趨勢如何？

回答：我認為趨勢是增加的。

4、未來(lái)的質(zhì)譜檢測中，哪些目標物合成具有優(yōu)勢？

回答：這個(gè)問(wèn)題很難有統一的答案，我認為只要有檢測需要的化合物就有合成的需要。

5、貴公司當前的獸藥標記產(chǎn)品中，自研產(chǎn)品比重如何？將來(lái)的投入規劃？

回答：常用的獸藥內標基本上都是自研的，更多標記產(chǎn)品的研發(fā)將根據市場(chǎng)需求確定，我們的目標是讓客戶(hù)從"有什么用什么"轉變?yōu)?quot;想用什么有什么"、"沒(méi)什么做什么"。

6、呋喃它酮-D5，標液經(jīng)過(guò)衍生化前處理，跟樣品中的對比，有時(shí)候峰型，響應不太好。排除流動(dòng)相問(wèn)題，請教可能是前處理哪個(gè)環(huán)節的原因？

回答：我揣測您想問(wèn)的可能是呋喃它酮代謝物-D5（AMOZ-D5）的衍生化，因為呋喃它酮-D5本身不需要進(jìn)行衍生化。峰型不好可能是檢測方法的問(wèn)題；響應不好可能有以下幾個(gè)方面的原因，或者是質(zhì)譜條件不合適造成質(zhì)譜響應低，或者衍生化反應不完全造成衍生化產(chǎn)物濃度低，或者衍生化產(chǎn)物損失較大沒(méi)有完全回收。在您的實(shí)驗中究竟是什么原因需要一步一步的仔細排查，在沒(méi)有詳細的實(shí)驗記錄和實(shí)驗數據的情況下我也很難判斷。如果您用的是阿爾塔的產(chǎn)品，可以與我們的技術(shù)支持人員溝通。

7、氘代和C同位素替代那個(gè)更有優(yōu)勢？

回答：各有優(yōu)勢，氘代的價(jià)格更低，碳13標記的穩定性更好一些，根據具體應用選擇吧。

8、獸藥標記產(chǎn)品的研制難點(diǎn)和壁壘都有哪些？

回答：每一種獸藥內標都要單獨合成，難點(diǎn)各不相同。

9、在磺胺類(lèi)測定方面有哪些創(chuàng )新點(diǎn)值得去深挖研究？

回答：我們聚焦在純品、單標和混標標準溶液的研究，也研究與產(chǎn)品對應的檢測方法，對基體中磺胺類(lèi)化合物的檢測未作深入探索。我認為與其他農獸藥相同，磺胺類(lèi)化合物的檢測不應只看母體，還應考慮不同代謝途徑產(chǎn)生的代謝物，準確定量可能還需要對應的同位素標記內標。

10、13C,18O,15N的原材料是否還很貴重，目前這些原材料是否主要掌握在國外公司？

回答：碳-13的原料目前仍由國外提供，氧-18和氮-15的應該有國產(chǎn)化的，不清楚價(jià)格是否比進(jìn)口的有優(yōu)勢。

11、穩定同位素內標的優(yōu)勢？

回答：穩定同位素內標用于同位素稀釋法對目標物進(jìn)行準確定量，減少基質(zhì)效應對檢測的干擾。

三、中國獸醫藥品監察所孫雷研究員問(wèn)題答疑

1、《食品安全法》實(shí)施以后，獸藥殘留檢測的標準以GB形式發(fā)布的較少，以前的GB/T、農業(yè)部等標準是否可以采納？

回答：《食品安全法》實(shí)施以后，獸殘檢測方法標準以GB形式發(fā)布的目前已經(jīng)有74個(gè)，之前以GB/T、農業(yè)部公告等形式發(fā)布的方法標準仍然有效，仍然可以采納。

2、GB開(kāi)頭的標準色譜條件，前處理過(guò)程是否允許偏離？

回答：殘留檢測方法標準在實(shí)驗室使用之前，一般是要根據自身儀器設備的配備情況進(jìn)行方法學(xué)驗證，轉化成本實(shí)驗室的SOP，然后根據SOP進(jìn)行樣品檢測的。標準中的儀器條件，包括色譜條件和質(zhì)譜條件一般都是參考條件，可以根據自己實(shí)驗室儀器進(jìn)行適當調整。前處理過(guò)程中不是關(guān)鍵步驟，在經(jīng)過(guò)數據考察在不影響檢測結果的情況下，也是可以適當調整的。

3、很多獸藥有葡萄糖苷代謝物形式存在，建立方法時(shí)無(wú)法判定酶解效果。如果有基質(zhì)標準物質(zhì)，是不是更可靠？

回答：有些獸藥在動(dòng)物體內代謝時(shí)會(huì )發(fā)生葡萄糖醛苷或硫酸芳基II相軛合反應，檢測時(shí)需要通過(guò)酶解將結合態(tài)釋放為游離態(tài)，酶解前后藥物含量差異大小需要借助藥物飼喂動(dòng)物后得到的活體動(dòng)物樣品檢測得到，如果基質(zhì)標物是通過(guò)飼喂動(dòng)物得到，是可以使用的。

4、目前，想申請參與獸藥殘留檢測方法標準的研制工作，是什么樣的流程？怎么申請？

回答：想申請參與獸殘檢測方法標準的研制工作，首先要根據本實(shí)驗室工作內容和已有工作基礎，找到農業(yè)行業(yè)標準制定和修訂項目指南中適合的項目，向全國獸藥殘留專(zhuān)家委員會(huì )辦公室提交項目申報書(shū)，包括項目實(shí)施方案。

5、非靶向檢測方法能成為國標嗎？

回答：多種類(lèi)藥物的非靶向殘留檢測方法，在通過(guò)對方法靈敏度、線(xiàn)性、準確度和精密度等一系列技術(shù)參數進(jìn)行考察后，如果滿(mǎn)足法規要求，是可以成為國標的，目前該類(lèi)方法在肉、蛋、奶中開(kāi)發(fā)的較多，肝臟、腎臟中較少。

6、獸藥殘留檢測方法標準研制過(guò)程中一般需要考察哪些技術(shù)參數？

回答：獸殘檢測方法標準研制過(guò)程中一般需要進(jìn)行方法靈敏度（定量限）、線(xiàn)性、回收率和精密度等技術(shù)參數考察，看是否滿(mǎn)足法規要求。

7、在進(jìn)行樣品中獸藥殘留檢測前，怎么選擇方法標準？

回答：選用檢測方法標準主要看方法的適用范圍，看是否包括所檢測樣品種類(lèi)，然后看方法性能，如方法的靈敏度是否滿(mǎn)足要求，前處理過(guò)程是否簡(jiǎn)便等。

8、肉蛋奶等動(dòng)物性食品中獸藥殘留檢測結果是否合格，怎么判定？

回答：動(dòng)物性食品中獸藥殘留檢測結果判定分為兩種情況：如果是禁用藥物、停用藥物或不得檢出的藥物，要根據藥物的判定限或方法定量限進(jìn)行判定；如果藥物是允許使用但有最大殘留限量規定，要依據最大殘留限量進(jìn)行判定。

9、同一化合物存在多個(gè)國標，其檢測結果如果不一致，怎么處理。同理，如果化合物既有單殘留也有多殘留檢測標準，定量如何協(xié)調？

回答：多個(gè)檢測方法檢測同一化合物，理論上檢測結果應該差別不大。要結合下達任務(wù)時(shí)推薦的方法標準以及本實(shí)驗室的已批準參數方法而定。

10、國標中食品安全檢測標準中的質(zhì)譜離子對（一般在標準中的資料性附錄中），是否容許偏離？

回答：獸藥殘留檢測方法標準中的定性定量離子對和儀器條件一樣，也是參考條件。要參考方法標準中的離子對，結合自身實(shí)驗室儀器配備情況選用響應值較強的離子對即可。

四、SCIEX中國首席應用專(zhuān)家李立軍問(wèn)題答疑

1、SCIEX串聯(lián)四級桿定量的方案適合于所有系列的型號嗎？

回答：適合于3500-7500純串聯(lián)四級桿及QTRAP，個(gè)別型號僅需要微調一些參數。

2、高分辨篩查方法是否所有QTOF類(lèi)儀器都可以用？

回答：所有QTOF儀器均可以參考，但因為SCIEX的QTOF速度足夠快，可以一針進(jìn)樣同時(shí)采集到所有待篩查的化合物的二級質(zhì)譜，其他型號的儀器可能需要兩針進(jìn)樣才行。

3、在QTRAP里，金剛烷胺干擾物質(zhì)怎么排除和區分？

回答：金剛烷胺有干擾具體要看數據才能分析，是兩對MRM均有，還是只有一對，保留時(shí)間是否穩定，還是基線(xiàn)噪音高等。